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    CAR-T(人)細胞

     

           CAR-T,全稱是Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy,嵌合抗原受體T細胞免疫療法。嵌合抗原受體T細胞(CAR-T細胞)是將某種腫瘤抗原的抗體識別區序列與CD3ζ鏈或FcεRIγ的胞內區編碼序列在體外串聯后,通過基因轉導的方法轉染T細胞,使其表面表達嵌合抗原受體(CAR)。T細胞被“重編碼”后,生成大量腫瘤特異性的CAR-T細胞。

           維根生物擁有自己獨的立抗體研發平臺、分子生物學平臺、病毒生產平臺以及細胞生物學功能研究平臺。公司已經篩選、驗證了靶向多種腫瘤相關抗原(TAA)的單鏈抗體抗體(scFv)序列(見左側欄),并構建了含有不同胞內結構域的CAR系列產品(見下圖),為細胞治療研究人員提供多樣化選擇。此外,維根生物還通過多種方式對CAR結構進行改造以增加其有效性和安全性,例如選擇短的的胞外結構域(short Hinge,SH)增強CAR的殺傷作用,添加可誘導的caspase-9(iCas9)作為安全開關,添加非免疫原性標簽以方便CAR表達檢測;利用不同的共刺激域來調節CAR的功能反應等。

     

     

           維根生物開發的科研型Lenti-CAR系列產品,該系列產品采用獨立的EF1a啟動表達GFP基因,CMV啟動子表達CAR基因,便于通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測慢病毒轉導率,同時避免GFP對CAR表達水平產生影響。

           維根生物具有慢病毒和逆轉錄病毒兩套CAR-T細胞制備體系,均生產出具有高滴度、高純度、無支原體污染的CAR假病毒滴度液。利用維根生物生產的CAR病毒液可以獲得高達90%的陽性轉導率。目前,維根生物具有下表所示的靶向40余種不同靶點的慢病毒和逆轉錄病毒CAR載體。

     

    不同靶點CAR列表

    TAA靶點

    慢病毒CAR

    逆轉錄病毒CAR

    靶點高表達細胞株

    CD19

    CD20

    CD22

    CD30

    CD33

    CD34

    CD38

    CD47

    CD70

    CD87

    CD123

    CD133

    CD138

    CD174

    x

    x

    x

    CD213a

    CD248/TEM1

    CD274

    CD276/B7-H3

    CD317

    BCMA

    CEA

    cMet

    CSF1R

    CSPG4

    EGFR

    EGFRvIII

    EpCAM

    EphA2

    FAP

    GD2

    GPC3

    GPMNB

    HER2

    LAMP1

    MSLN

    Muc1

    Muc16

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    x

    x

    PSCA

    PSMA

    TEM8

     

           此外,維根生物具有完善的CAR-T細胞體內、體外功能研究平臺和技術體系,包括:

          1)腫瘤細胞標記熒光素酶檢測CAR-T細胞殺傷能力;

          2)流式細胞術分析CAR表達率和T細胞殺傷后表型變化;

          3)ELISA檢測細胞因子分泌檢測CAR-T細胞活化水平;

          4)qPCR和流式細胞術分析T細胞耗竭表型;

          5)免疫缺陷小鼠的CAR-T細胞體內藥效學分析平臺;

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